د Monkeypox ویروس ریښتیني وخت PCR کټ

لنډ معلومات:

بلی.نه	B001P-01	اندازه	48 ټیسټ/کیټ
نمونه	سیروم/ د زخم اخراج	ټرانس.& Sto.تودوخه	-25～-15℃
بڼه	پریمکس په 8 پټو PCR ټیوبونو کې لیوفیلیز شوی او الیټ شوی و
د تطبیق وړ وسیله	د ریښتیني وخت PCR وسیله لکه ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio او BTK-8

موږ ته بریښنالیک واستوئ

د محصول تفصیل

د محصول ټګ

د محصول توضیحات

اراده کارول

دا د ریښتیني وخت PCR سیسټمونو په کارولو سره د انسان سیروم یا د زخم exudate نمونو کې د Monkeypox ویروس کشف لپاره کارول کیږي.

د ازموینې اصول

دا محصول د فلوروسینټ تحقیقاتو پراساس Taqman® د ریښتیني وخت PCR ارزونې سیسټم دی.ځانګړي پرائمرونه او تحقیقات د Monkeypox ویروس د F3L جین کشف لپاره ډیزاین شوي.داخلي کنټرول چې د انسان ساتل شوي جین په نښه کوي د نمونې راټولول، د نمونې اداره کول او د ریښتیني وخت PCR پروسې څارنه کوي ترڅو د غلط منفي پایلو مخه ونیسي.کټ یو بشپړ پریمکس لیوفیلیز سیسټم دی، کوم چې د مونکیپکس ویروس کشف لپاره اړین توکي شامل دي: نیوکلیک اسید امپلیفیکیشن انزایم، UDG انزایم، د غبرګون بفر، ځانګړی پریمر او تحقیقات.

اصلي منځپانګې

چمتو شوي اجزا په جدول کې لیست شوي دي.

اجزا	بسته	اجزا
Monkeypox ویروسلیوفیلیز پریمکس	8 پټی PCR ټیوب× 6 پاکټونه	پرائمرونه، پروبونه، dNTP/dUTP مکس، Mg2+، Taq DNA پولیمریز، UDG انزایم
د MPV مثبت کنټرول	400 μL × 1 ټیوب	د DNA ترتیبونه چې هدف جین لري
د MPV منفي کنټرول	400 μL × 1 ټیوب	د DNA سلسله چې د انسان جین برخې لري
د حل کولو حل	1 ملی لیتر × 1 ټیوب	ثبات کوونکی
د تطابق تصدیق	1 ټوټه	/

د عملیاتو جریان

1. نمونهټولګه:نمونه باید په تعقیم ټیوبونو کې راټول شي

د معیاري تخنیکي مشخصاتو سره.

2. د ریجنټ چمتو کول (د ریجنټ چمتو کولو ساحه)

د کټ اجزا واخلئ، د سټنډرډ کارولو لپاره یې د خونې د حرارت درجه کې توازن کړئ.

3. د نمونې پروسس کول (د نمونې پروسس کولو ساحه)

3.1 د نیوکلیک اسید استخراج

دا سپارښتنه کیږي چې د 200μL مایع نمونې واخلئ، د نیوکلیک اسید استخراج لپاره مثبت کنټرول او منفي کنټرول، د ورته اړتیاو او د ویروس DNA استخراج کټونو پروسیجرونو سره سم.

3.2 Lyophilized پوډر منحل او د نمونې اضافه کول

د Monkeypox Virus Lyophilized premix د نمونو د شمیر سره سم چمتو کړئ.یوه نمونه یو PCR ټیوب ته اړتیا لري چې د لیوفیلیز پریمکس پاؤډر لري.منفي کنټرول او مثبت کنټرول باید د دوه نمونو په توګه وکارول شي.

(1) په هر PCR ټیوب کې 15μL منحل محلول اضافه کړئ چې لیوفیلیز پریمکس لري، بیا په ترتیب سره په هر PCR ټیوب کې 5μL استخراج شوي نمونې/منفي کنټرول/مثبت کنټرول اضافه کړئ.

(2) د PCR ټیوبونه په کلکه پوښ کړئ ، د PCR ټیوبونه د لاس په واسطه وخورئ تر هغه چې لایوفیل شوی پوډر په بشپړ ډول منحل او ګډ شوی نه وي ، د سمدستي ټیټ سرعت سینټرفیوګیشن پواسطه مایع د PCR ټیوبونو لاندې ته راټول کړئ.

(3) که چیرې د کشف لپاره عام ریښتیني وخت PCR وسیله وکاروئ ، نو د PCR ټیوبونه مستقیم د امپلیفیکیشن ساحې ته انتقال کړئ؛که د کشف لپاره BTK-8 وکاروئ، نو لاندې عملیات ترسره کولو ته اړتیا لرئ: د PCR ټیوب څخه د BTK-8 عکس العمل چپ څاه ته 10 μL مایع انتقال کړئ.یو PCR ټیوب په چپ کې د یوې څاه سره مطابقت لري.د پایپټینګ عملیاتو په جریان کې، ډاډ ترلاسه کړئ چې پایپټ 90 درجې عمودی دی.د ایروسول خنډ پایپټ لارښوونې باید د څاه په مینځ کې د اعتدال ځواک سره ځای په ځای شي او د پایپټ فشارول ودروي کله چې لومړی ګیر ته ورسیږي (د بلبلونو څخه مخنیوي لپاره).وروسته له دې چې څاګانې ډکې شي، د عکس العمل چپ جھلی راوباسئ ترڅو ټولې څاګانې پوښي او بیا چپ د امپلیفیکیشن کشف ساحې ته لیږدول کیږي.

4. د PCR پراخوالی (د کشف ساحه)

4.1 د PCR ټیوبونه / د عکس العمل چپ د عکس العمل ټانک کې واچوئ او د هر عکس العمل نومونه په ورته ترتیب کې ښه تنظیم کړئ.

4.2 د کشف فلوروسینس ترتیبات: (1) Monkeypox ویروس (FAM)؛(2) داخلي کنټرول (CY5).

4.3 لاندې سایکل چلولو پروتوکول چل کړئ

د ABI7500 پروتوکول، Bio-Rad CFX96، SLAN-96S، QuantStudio:

ګامونه		د حرارت درجه	وخت	سایکلونه
1	مخکې له ځنډه	95℃	2 دقیقې	1
2	له منځه وړل	95℃	10 s	45
2	annealing، غزول، د فلوروسینس استملاک	60℃	30 s	45

د BTK-8 پروتوکول:

ګامونه		د حرارت درجه	وخت	سایکلونه
1	مخکې له ځنډه	95℃	2 دقیقې	1
2	له منځه وړل	95℃	5 s	45
2	annealing، غزول، د فلوروسینس استملاک	60℃	14 s	45

5. د پایلو تحلیل (مهرباني وکړئ د وسیلې کارونکي لارښود ته مراجعه وکړئ)

د غبرګون وروسته، پایلې به په اوتومات ډول خوندي شي.د تحلیل کولو لپاره "تجزیه" کلیک وکړئ، او وسیله به په اتوماتيک ډول د پایلې په کالم کې د هرې نمونې Ct ارزښتونه تشریح کړي.د منفي او مثبت کنټرول پایلې باید لاندې "6. د کیفیت کنټرول" سره مطابقت ولري.

6. د کیفیت کنټرول

6.1 منفي کنټرول: په FAM چینل کې Ct یا Ct>40 نشته، په CY5 چینل کې Ct≤40 د نورمال امپلیفیکیشن وکر سره.

6.2 مثبت کنټرول: Ct≤35 په FAM چینل کې د نورمال امپلیفیکیشن وکر سره ، Ct≤40 په CY5 چینل کې د نورمال امپلیفیکیشن وکر سره.

6.3 پایله د اعتبار وړ ده که چیرې پورته ټول معیارونه پوره شي.که نه نو، نتیجه به باطله وي.

د پایلې تشریح

لاندې پایلې ممکن دي:

	د FAM چینل د Ct ارزښت	د CY5 چینل د Ct ارزښت	تفسیر
1#	نه Ct یا Ct> 40	≤40	د Monkeypox ویروس منفي
2#	≤40	کومې پایلې	د Monkeypox ویروس مثبت
3#	40-45	≤40	بیا ازموینه;که دا لاهم 40 ~ 45 وي، د 1# په توګه راپور کړئ
4#	نه Ct یا Ct> 40	نه Ct یا Ct> 40	باطل

نوټ: که ناسمه پایله رامنځته شي، نمونه باید راټول شي او بیا ازموینه وشي.

د امر معلومات

د محصول نوم	بلی.نه	اندازه	نمونه	د شیلف ژوند	ټرانس.& Sto.تودوخه
د Monkeypox ویروس ریښتیني وخت PCR کټ	B001P-01	48 ټیسټونه / کټ	سیروم/ د زخم اخراج	12 میاشتې	-25～-15℃